La película comienza con un intertítulo que dice: “This film should be played loud!” (“Esta película debe verse a todo volumen”) y, entre las canciones del concierto, documenta la carrera y las influencias musicales de The Band, un grupo de rock norteamericano, mediante entrevistas personales a sus miembros, que comenzaron su carrera como banda de apoyo del cantante canadiense Ronnie Hawkins a finales de la década de 1950. Tras el intertítulo, la película continúa con la última canción del concierto, una versión de “Don`t Do It” que el grupo tocó como bis la noche del 25 de noviembre de 1976. A continuación, hace una elipsis para volver al comienzo del concierto y seguir un orden aproximadamente cronológico del mismo, en el que el grupo se acompaña de una sección de vientos a lo largo de canciones como “Up on Cripple Creek” y “The Night They Drove Old Dixie Down”. A lo largo del concierto, varios artistas invitados comparten escenario con The Band, entre los que figuran Muddy Waters, Paul Butterfield, Neil Young, Joni Mitchell, Van Morrison, Dr. John, Neil Diamond y Eric Clapton, los cuales interpretan canciones del grupo, de los invitados o incluso temas tradicionales de diversos géneros musicales como folk, pop, rock, blues y rock and roll. El documental intercala las canciones del concierto con escenas de estudio y entrevistas que Scorsese dirige a los miembros del grupo, en las que rememoran su historia, sus aficiones musicales y anécdotas. Entre otras, Robertson narra la entrada de Garth Hudson en el grupo con la condición de que los demás miembros le pagasen 10 dólares semanales por darles lecciones musicales, y describe la experiencia de tocar en un club quemado propiedad de Rick Ruby. Richard Manuel recuerda algunos de los primeros nombres del grupo, tales como “The Honkies” y “The Crackers”, antes de empezar a ser denominados simplemente como The Band por su asociación con Bob Dylan durante el tiempo que pasaron con él en Woodstock (Nueva York). Por otra parte, Rick Danko muestra a Scorsese los estudios de grabación Shangri-La, propiedad del grupo, y pone una cinta con una grabación del tema “Sip the Wine”, que el músico publicó dos años después en su primer álbum de estudio en solitario. Un tema recurrente en las respuestas de Robertson a Scorsese es que el concierto marca el final de una era tras dieciséis años en la carretera. Según dice el propio Robertson: “Eso es “The Last Waltz”. Dieciséis años en la carretera. El número empieza a asustarte. Quiero decir, no podría vivir veinte años en la carretera. No creo ni que pudiera discutirlo”.
